4-hydroxy-2-nonenal as a marker of the oxidative stress in brains of dogs with canine distemper / 4-hidroxi-2-nonenal como marcador de estresse oxidativo no cérebro de cães com cinomose

Canine Distemper is a disease caused by Canine morbillivirus (CM), a pantropic virus that can affect the central nervous system (CNS), causing demyelination. However, the pathogenesis of this lesion remains to be clarified. Brain samples of 14 naturally infected dogs by CM were analyzed to evaluate the presence of oxidative stress and demyelination. RT-PCR assay was performed to confirm a diagnosis of canine distemper in the brain, immunohistochemistry anti-CM was used to localize the viral proteins in the tissue, and anti-4-hydroxy-2-nonenal (4-HNE) was a marker of a product of lipid peroxidation. The results showed the presence of viral proteins in the demyelinated area with the presence of 4-HNE. Our results suggest that the CM virus infection causes oxidative stress leading to lipid peroxidation, which causes tissue damage and demyelination. In conclusion, oxidative stress plays a significant role in canine distemper pathogenesis in the CNS.(AU)

A cinomose canina é uma doença causada pelo Morbilivírus canino (CM), um vírus pantrópico que pode afetar o sistema nervoso central (SNC), causando desmielinização. No entanto, a patogênese dessa lesão não está totalmente esclarecida. RT-PCR e imuno-histoquímica foram realizadas para confirmação do diagnóstico de cinomose em amostras de encéfalo de 14 cães naturalmente infectados. Após confirmação, foi realizada uma avaliação do estresse oxidativo por imuno-histoquímica com uso de anti-4-hidroxi-nonenal (4HNE) como marcador de produtos resultantes da peroxidação lipídica. Os resultados sugerem que a infecção pelo CM causa estresse oxidativo no tecido, levando a peroxidação lipídica, a qual causa danos ao tecido, culminando com desmielinização. Conclui-se que o estresse oxidativo tem papel importante na patogênese da cinomose canina no sistema nervoso central.(AU)

Expression of Vitamin D Receptor and Vitamin D Receptor Gene Polymorphisms (BsmI, FokI, and TaqI) in Patients with Pterygium / Expressão do gene do receptor da vitamina D e de seus polimorfismos (BsmI, FokI e TaqI) em pacientes com pterígio

ABSTRACT Purpose: This study aimed to determine the role of vitamin D receptor in the pathogenesis of pterygium. The vitamin D receptor eexpression levels in pterygium tissue, blood vitamin D levels, and frequency of selected vitamin D receptor gene polymorphisms (BsmI, FokI, and TaqI) were compared between patients with pterygium and healthy participants. Methods: The study included patients with pterygiumeee (n=50) and healthy volunteers (n=50). The serum vitamin D levels were measured for both groups. Immunohistochemical staining for vitamin D receptor ewas performed on sections obtained from the pterygium and adjacent healthy conjunctival tissues of the same individuals. The genomic existence of vitamin D receptor epolymorphisms (BsmI, FokI, and TaqI) were analyzed in DNA obtained from venous blood of participants using polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism methods. Results: There was no difference found between the serum vitamin D levels of patients with pterygium and healthy controls. However, tissue expression of vitamin D receptor was higher in the pterygium endothelial cells of micro-vessels (p=0.002), subepithelial stromal (p=0.04), and intravascular inflammatory cells (p=0.0001), in comparison with the adjacent healthy conjunctival tissue. Moreover, while the BBtt haplotype was 2-fold higher, the bbTt haplotype was 2.5-fold lower, and the BbTT haplotype was 2.25-fold lower in the control group than in the pterygium group (p<0.001). Conclusions: Vitamin D serum levels did not differ between the healthy and pterygium groups. Vitamin D receptor expression was increased in the pterygium tissue versus the adjacent healthy tissue. However, vitamin D receptor polymorphism analysis in patients with pterygium did not reveal any significant difference in BsmI, FokI, or TaqI polymorphisms in comparison with the healthy volunteers.(AU)

RESUMO Objetivo: Determinar o papel do receptor da vitamina D na patogênese do pterígio. Os níveis de expressão do receptor da vitamina D no tecido do pterígio, os níveis sanguíneos de vitamina D e a frequência de alguns polimorfismos do gene do receptor da vitamina D (BsmI, FokI e TaqI) foram comparados entre pacientes com pterígio e participantes saudáveis. Métodos: Foram incluídos pacientes com pterígio (n=50) e voluntários saudáveis (n=50). Os níveis séricos de vitamina D foram medidos em ambos os grupos. Foi feita uma coloração imuno-histoquímica para o receptor da vitamina D em cortes obtidos do pterígio e dos tecidos conjuntivais saudáveis adjacentes dos mesmos indivíduos. A existência de polimorfismos do receptor da vitamina D (BsmI, FokI e TaqI) no genoma foi analisada em DNA obtido do sangue venoso dos participantes, usando métodos de Polymerase chain reaction (PCR) e RFLP. Resultados: Não foi observada nenhuma diferença entre os níveis séricos de vitamina D dos pacientes com pterígio e os dos controles saudáveis. Entretanto, a expressão tissular do receptor da vitamina D foi maior nas células endoteliais dos microvasos do pterígio (p=0,002), nas células estromais sub-epiteliais (p=0,04) e nas células inflamatórias intravasculares (p=0,0001), quando comparada à expressão no tecido conjuntival saudável adjacente. Além disso, embora o haplótipo BBtt tenha sido duas vezes mais frequente, o haplótipo bbTt foi 2,5 vezes menos frequente e o haplótipo BbTT foi 2,25 vezes menos frequente no grupo de controle do que no grupo com pterígio (p<0,001). Conclusões: Os níveis séricos de vitamina D não apresentaram diferenças entre o grupo de pessoas saudáveis e o com pterígio. A expressão do receptor da vitamina D mostrou-se maior no grupo com pterígio do que no tecido saudável adjacente. Entretanto, a análise dos polimorfismos do receptor da vitamina D nos pacientes com pterígio não revelou qualquer diferença significativa nos polimorfismos BsmI, FokI ou TaqI em comparação com os voluntários saudáveis.(AU)

Reactivos de inmunohistoquímica para diagnóstico diferencial oncológico de neoplasias del sistema nervioso central / Immunohistochemical reagents for differential cancer diagnosis of central nervous system neoplasms

INTRODUCCIÓN: El Departamento de Equipo Funcional de Patología Quirúrgica y Necropsia del Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas, en relación a nuevos reactivos de inmunohistoquímica para diagnóstico oncológico de tumores del sistema nervioso central, ha solicitado la opinión técnica de la UFETS. 2. Existen neoplasias del sistema nervioso central que presentan una pobre respuesta al tratamiento estandarizado y un peor pronóstico, por lo cual ameritan un diagnóstico eficaz y temprano. Los marcadores para inmunohistoquímica H3 K27M, H3 K27m3, GAB-1, YAP-1, H3.3G34R y MAP-2 permitirían un diagnóstico más eficaz e incluso influiría en su tratamiento y seguimiento. Estrategia de búsqueda de información: a) Pregunta Clínica: Sección A: SNC: En la población con tumores de SNC, ¿Cuál es la utilidad de los marcadores de H3 K27m3, GAB-1, YAP-1, H3.3G34R y MAP-2 como diagnóstico oncológico en tumores del SNC? b) Recolecciòn de los Manuscritos a Revisar: Tipos de estudios: La estrategia de búsqueda sistemática de información científica para el desarrollo del presente informe se realizó siguiendo las recomendaciones de la Pirámide jerárquica de la evidencia propuesta por Haynes y se consideró los siguientes estudios: Sumarios y guías de práctica clínica. Revisiones sistemáticas y/o meta-análisis. Ensayos Controlados Aleatorizados (ECA) Estudios Observacionales (cohortes, caso y control, descriptivos) No hubo limitaciones acerca de la fecha de publicación o el idioma para ningún estudio. DISCUSION: Tomando los criterios para un marco de valor de la Health Technology Assessment International (2018)13 para la toma de decisiones y formulación de la recomendación, se encontró una serie de estudios de los cuales no se encontraron revisiones sistemáticas ni estudios diagnósticos. La calidad de evidencia evaluada con metodología GRADE fue baja en todos los estudios evaluados, considerando el diseño de estudio observacional, y por el pequeño tamaño de las muestras estudiadas. Esta valoración indica que los resultados obtenidos en el mundo real por la aplicación de estas tecnologías pueden ser significativamente diferentes a los resultados diagnósticos de los estudios presentados. Los estudios que evaluaron el H3K27M y H3K27me3 evaluaron la utilidad diagnóstica de los anticuerpos para detección de estas mutaciones. El diagnóstico de glioma de línea media con mutación K27M permite reconocer una entidad de peor pronóstico y sólo se logra con la aplicación de estos marcadores. Si bien existe una cantidad limitada de evidencia, los estudios llevados por Tina Huang y col. evaluaron el rendimiento diagnóstico de estos marcadores comparándolos con estudios de mutación en muestras de tejido con diagnóstico de glioma (n=69) y tejido sano (n=4) en población pediátrica. Otro estudio por Sriram Venneti y col. tomaron como población 290 muestras de cáncer con mutación H3F3A K27M conocida. Los estudios reportan una sensibilidad 100% y una especificidad 100% para el marcador H3K27M y Sriram Venneti reportó una sensibilidad 100% y especificidad 98% para H3K27me3. Ambos marcadores cuentan con una utilidad diagnóstica importante su aplicación permitiría diagnosticar precozmente una enfermedad con mal pronóstico en edad pediátrica y adulta. El GAB-1 y el YAP-1 intervienen en el proceso de desarrollo del cáncer a nivel de sistema nervioso central. La detección de ambas mutaciones por inmnohistoquimica permite la clasificación molecular del meduloblastoma en SHH, WNT y no-SHH/WNT. El determinar el subtipo molecular es importante ya que cada uno cuenta con un pronóstico diferente y su reconocimiento permitiría realizar un mejor diagnóstico y hasta influir en el tipo de tratamiento que recibiría. David W. Ellison y su equipo reconocer al meduloblastoma como una enfermedad heterogenea y a través de inmunohistoquímica determinan los subtipos de meduloblastoma en una cohorte de 235 muestras en pacientes de un rango de edad 0.4 ­ 52 años. Los subtipos moleculares SHH, WNT, y no SHH/WNT correspondían al 31%, 14%, y 55% de los casos. Hye Sook Min y col. evaluaron la detección de mutaciones a través de anticuerpos para inmunohistoquímica en cada subtipo molecular de meduloblastoma. El GAB-1 fue hallado en el 100% de los subtipos SHH y en sólo el 25% del subtipo WNT. El YAP-1 se encontró en el 50% de los subtipos WNT, el 80%de SHH y sólo el 2% en los subtipos no-SHH/WNT. Ambos marcadores son relevantes para poder clasificar adecuadamente cada subtipo molecular de meduloblastoma. Las mutaciones H3.3G34R y MAP-2 están asociadas con la progresión de enfermedad oncológica. Farhana Haque y col. evaluaron la eficacia de la inmunotinción para la detección de H3.3G34R en una cohorte de 22 muestras de tumores incluidos en parafina con mutación H3.3 G34R conocida. 17 eran tumores supratentoriales de alto grado, 2 gangliomas anaplasicos, 2 oligoastrocitomas grado III y 1 glioma de alto grado. La IHC detectó con éxito la proteína mutante correspondiente en todos los casos (11/11 G34R). Los resultados demostraron una concordancia adecuada entre estudio diagnóstico con inmunohistoquímica y estudio mutacional correspondiente. Se reportó una sensibilidad del 100% y especificidad del 98% para diagnóstico. Con respecto al estudio de inmunohistoquímica del MAP-2, Ingmar Blümcke y su grupo de estudio demostraron que el análisis por inmunohistoquímica presentó una sensibilidad del 98% y una alta especificidad para la detección de esta mutación, la cual está asociada con la progresión de tumores astrocíticos de alto grado en el sistema nervioso central. En este momento el INEN no cuenta con marcadores que puedan diagnosticar los gliomas de línea media con mutación K27M, una entidad de pobre repuesta al tratamiento y peor pronóstico y que por ende ameritaría un diagnóstico precoz. De la misma forma, la clasificación molecular de los meduloblastomas es algo importante. Cada subtipo molecular cuenta con un pronóstico diferente lo cual podría impactar en el tratamiento y la forma de seguimiento de los pacientes. Tampoco se cuenta con una forma de detección de la mutación 3.3 G34R y el MAP-2 cuenta con una alta eficacia diagnóstica para el diagnóstico de astrocitomas de alto grado. Ninguno de estos procedimientos diagnósticos está siendo realizado en este momento por lo cual la aplicación de estos marcadores supone un impacto positivo al considerar la población de pacientes diagnosticados que contarían con un tratamiento adecuado. Todos estos marcadores se integrarían al arsenal diagnóstico, sin reemplazar otro marcador que ya se esté aplicando en el INEN. El impacto económico de esta prueba para el INEN es incierto y es necesario realizar un análisis de impacto presupuestario para estimar cuantitativamente el gasto sanitario del uso de esta prueba en la población con linfomas. CONCLUSIONES: Algunas patologías oncológicas del sistema nervioso centran tienen una mala respuesta al tratamiento convencional, lo cual les da un peor pronóstico y un curso más agressivo. Los marcadores H3 K27M y H3 K27m3 presentan una alta sensibilidad y especificidad para el diagnóstico de gliomas de la línea media con mutación K27M. Esta entidad cuenta con una peor respuesta a tratamiento y peor pronóstico. Su detección temprana podría permitir un mejor tratamiento y optimizar las pautas de seguimiento. Los marcadores H3.3G34R y MAP-2 reconocen mutaciones que intervienen con el desarrollo del cáncer. Ambos cuentan con una alta sensibilidad y especificidad para el diagnóstico de tumores astrocíticos de alto grado. Los marcadores GAB-1 y YAP-1 se utilizan para determinar los subtipos moleculares de meduloblastoma, teniendo el GAB-1 una sensibilidad alta para el tipo SHH. Cada subtipo molecular de meduloblastoma cuenta con un pronóstico diferente lo cual podría influenciar en la forma de tratamiento que recibirían. Los marcadores de inmunohistoquímica permitirían un eficaz y temprano diagnóstico, lo cual influiría positivamente en el pronóstico de los pacientes con estas patologías, las cuales hasta la fecha no han sido diagnosticadas adecuadamente.

Regeneration of Salivary Gland Defects of Diabetic Wistar Rats Post Human Dental Pulp Stem Cells Intraglandular Transplantation on Acinar Cell Vacuolization and Interleukin-10 Serum Level

Abstract Objective: To investigate the regeneration of rat's salivary gland diabetic defect after intraglandular transplantation of Human Dental Pulp Stem Cells (HDPSCs) on acinar cell vacuolization and Interleukin-10 (IL-10). Material and Methods: HDPSCs isolated from the dental pulp of first premolars #34. HDPSCs from the 3rd passage was characterized by immunocytochemistry of CD73, CD90, CD105 and CD45. Twenty-four male Wistar rats, 3-month-old, 250-300 grams induced with Streptozotocin 30 mg/kg body weight to create diabetes mellitus (DM) divided into 4 groups (n=6); positive control group on Day-7; positive control group on Day-14; treatment group Day-7 (DM+5.105HDPSCs); treatment group on Day-14. On Day-7 and Day-14, rats were sacrificed. Histopathological examination performed to analyze acinar cells vacuolization while Enzyme-linked Immunoabsorbent Assay to measure IL-10 serum level. Data obtained were analyzed statistically using multiple comparisons Bonferroni test, Kruskal Wallis, Shapiro-Wilk and Levene's test result Results: The highest acinar cell vacuolization found in control group Day 14 (0.239 ± 0.132), meanwhile the lowest acinar cell vacuolization found in treatment group Day 7 (0.019 ± 0.035) with significant difference (p=0.003). The highest IL-10 serum level found in treatment group Day 14 (175.583 ± 120.075) with significant difference (p=0.001) Conclusion: Transplantation of HDPSC was able to regenerate submandibular salivary gland defects in diabetic rats by decreasing acinar cell vacuolization and slightly increase IL-10 serum level.

Estudo de candidatos a biomarcadores moleculares de prognóstico em carcinoma renal de células claras / Study of molecular biomarker candidates for prognosis in clear cell renal carcinoma

O carcinoma de células renais (CCR) é o tumor mais agressivo que afeta o rim de pessoas adultas. O CCR é uma doença heterogênea, com diferentes alterações moleculares e variados patrões histológicos e clínicos que apresentam evolução diferente. Atualmente apenas variáveis anatomopatológicas clássicas são utilizadas para determinar o prognóstico dos pacientes. Utilizando uma plataforma de microarranjos de DNA, nosso grupo identificou em um trabalho anterior um conjunto de genes que se encontram diferencialmente expressos em tumores de rim. Neste estudo, nove candidatos foram selecionados para avaliação como marcadores de prognóstico no CCR. Foi confirmada a alteração na expressão dos genes ARNTL, ACTN4 e EPAS1 (p < 0,05) em amostras tumorais de CCR através de PCR em tempo real. Adicionalmente, foi observada a alteração da expressão dos genes ARNTL, EPAS1 e CASP7 em linhagens celulares imortalizadas derivadas de tumores renais, recapitulando por tanto, as alterações observadas nos tumores obtidos de pacientes. Posteriormente investigamos o padrão de expressão proteica destes candidatos por imunohistoquímica utilizando microarranjos de tecidos. Foi detectada a diminuição significativa (p < 0,05) da expressão das proteínas ACTN4, ARNTL, CASP7 e EPAS1 em tumores de pacientes com CCR relativamente ao tecido renal não tumoral. Além disso, foi possível determinar valores de imunomarcação capazes de estratificar pacientes com CCR em diferentes grupos de risco quanto à sobrevida câncer-específica, que adicionalmente apresentaram associação significativa com parâmetros anatomopatológicos utilizados na clínica. As imunomarcações de ACTN4, ARNTL, e EPAS1 se mostraram parâmetros independentes de prognóstico de sobrevida dos pacientes. A imunomarcação de CASP7 foi capaz de identificar subgrupos de pacientes com pior prognóstico dentro de um conjunto de pacientes de baixo risco em função do estadio clinico, além de identificar pacientes com menor risco de morte pelo câncer entre aqueles apresentaram recorrência em até 5 após a cirurgia. O conjunto de resultados obtidos aponta para um novo conjunto de biomarcadores moleculares com potencial relevância para auxiliar no prognóstico de pacientes com carcinoma de células renais

The renal cell carcinoma (RCC) is the most aggressive tumor that affects the kidney in adult people. The RCC is a heterogeneous disease, with many different molecular alterations and varied histological and clinical patterns with different outcome. Currently, only classic anatomopathological variables are used to determine patients' prognosis. Using a DNA microarray platform, our group identified in a previous work a set of genes differentially expressed in renal tumors. In this study, nine candidates were selected for evaluation as prognostic biomarkers in RCC. Alteration of the gene expression in RCC tumor samples was confirmed for ARNTL, ACTN4 and EPAS1 (p < 0.05) by real time PCR. Additionally, gene expression changes of ARNTL, EPAS1 and CASP7 were also observed in immortalized cell lines derived from renal tumors, recapitulating the expression changes detected in the patients' tumors. Next, we used tissue microarrays to investigate the protein expression of the selected candidates by immunohistochemistry. Expression of the proteins ACTN4, ARNTL, CASP7 and EPAS1 was detected as significantly downregulated (p < 0.05) in patients´ tumors relative to non-tumor renal tissue. Furthermore, immunostaining patterns of the selected candidates were able to stratify patients with RCC in different risk groups according to cancer-specific survival, which also showed significant associations with anatomopathological parameters used in the clinics. ACTN4, ARNTL and EPAS1 immunostaining resulted as independent prognostic parameters of patient survival. CASP7 immunostaining was able to identify subgroups of patients with worse prognosis in a set of low risk patients as determined by their clinical stage, and also identified patients with lower risk of death from cancer amongst patients that relapsed within 5 years after surgery. Overall, these results point to a new set of molecular biomarkers with potential relevance to help in the prognosis of patients with renal cell carcinoma

Comparação da evidenciação dos miofibroblastos marcados por imuno-histoquímica em tecido de granulação quando fixado por formol ou por álcool a 70% / Comparison of myofibroblast visualization by immunohistochemical staining in granulation tissue fixed in formaldehyde or 70% alcohol

Introdução: Para o adequado estudo anatomopatológico dos tecidos obtidos dos pacientes é crucial a boa técnica para a melhor evidenciação das células pesquisadas. É imprescindível que não só a técnica ideal de coloração/marcação seja utilizada, mas também a correta técnica de fixação da peça cirúrgica. Em trabalho prévio pesquisando miofibroblastos e contração na pele restaurada de áreas doadoras de enxertos de pele de espessura parcial, verificamos baixa densidade de miofibroblastos, ao contrário dos estudos em tecido de granulação. Investigando as causas disso, e baseando-se em artigo específico sobre a eficácia da evidenciação imuno-histoquímica com diferentes métodos de fixação tecidual, comparamos a eficácia dos diferentes fixadores, formol a 10% e álcool a 70% para a evidenciação de miofibroblastos em tecido de granulação de úlceras crônicas de 21 pacientes. Método: Estudamos 42 amostras por meio de técnica imuno-histoquímica, utilizando-se o anticorpo anti-Smooth Muscle Actin, nas quais contamos os miofibrobastos em 10 campos com aumento de 400 X. Resultados: Demonstraram-se melhores resultados qualitativo e quantitativo no material fixado em álcool, quando comparado ao fixado em formol, com densidades médias de miofibroblastos de 86,5 e 48 células/mm2, respectivamente, o que nos leva a recomendar o álcool como fixador de tecidos para estas análises imuno-histoquímicas.

Background: The use of a good visualization technique is crucial for an adequate pathological anatomy study of tissues obtained from patients. Optimal staining and fixation techniques of the surgical piece are essential. In a previous study investigating myofibroblasts and contraction in split skingraft donor sites, a low density of myofibroblasts was observed, as opposed to studies in granulation studies. To investigate the causes for this finding and based on a specific manuscript on the efficacy of immunohistochemical visualization using different tissue fixation methods, we compared the efficacy of fixation in 10% formaldehyde and 70% alcohol for the visualization of myofibroblasts in granulation tissues of chronic ulcers in 21 patients. Method: Forty-two samples were studied by immunohistochemistry, using the anti-Smooth Muscle Actin antibody, and myofibroblasts were counted in 10 fields with a magnification of 400X. Results: Better qualitative and quantitative results were observed in alcohol-fixed materials, when compared to those fixed in formaldehyde, with mean myofibroblasts densities of 86.5 and 48 cells/mm2, respectively, which encourages us to recommend the use of alcohol for tissue fixation in immunohistochemical studies.

Expressão de proteínas de choque térmico na epilepsia do lobo temporal mesial / Heat shock protein expression in mesial temporal lobe epilepsy

OBJETIVOS: Em modelos animais de epilepsia, heat shock protein 70 (HSP70) tem sua expressão proporcional à intensidade de crises. A HSP90, dentre diversas ações, regula a sintase neuronal do óxido nítrico e proteínas do citoesqueleto. Devido ao provável papel protetor de HSP70 e à relação de HSP90 com proteínas envolvidas na epileptogênese, decidimos investigar a expressão imunohistoquímica destas proteínas na epilepsia do lobo temporal mesial (ELTM). MÉTODOS: Hipocampos de pacientes ELTM fármaco-resistentes foram obtidos durante o procedimento cirúrgico e hipocampos controle foram obtidos de necrópsias. Os espécimes obtidos foram tratados igualmente e submetidos a imunohistoquímica. Medidas de imuno-reatividade positiva foram obtidas com o software ImageJ. RESULTADOS: Nossas medidas mostraram menor expressão de HSP70 e HSP90 no hipocampo de pacientes epilépticos do que nos controles em praticamente todas as regiões do hipocampo. Para HSP70 as diferenças significativas foram encontradas na região subicular e para HSP90 em todas, exceto fascia dentata e subículo. CONCLUSÃO: Diferente dos achados em modelos animais, nossos resultados indicam que crises crônicas nos pacientes ELTM não são estímulo suficiente para ativação exacerbada de HSP70 e HSP90. Condições inerentes à ELTM podem ser determinantes desta menor expressão. Ainda, nossos achados sugerem que a baixa expressão de HSPs pode estar relacionada a manutenção das crises.

OBJECTIVE: In animal models of epilepsy, heat shock protein 70 (HSP70) has its expression proportional to seizure severity. Among several functions on biological systems, HSP90 regulates nitric oxide synthase and cytoskeletal proteins. Due to the plausible protective role of HSP70 and the relationship of HSP90 with proteins involved in epileptogenesis, we looked at HSP70 and 90 immunohistochemical expression in temporal lobe epilepsy (TLE). METHODS: Hippocampi were obtained from medically intractable TLE patients and control hippocampi were from necropsy cases. Specimens were equally treated and submitted to imunohistochemistry to HSP70 and HSP90. Positive immunoreactivity was estimated using the software ImageJ. RESULTS: Our results showed significant lower expression of HSP70 and HSP90 in epileptic patients when compared to controls in almost all hippocampal regions. To HSP70 subicular region exhibited significant difference and to HSP90 all regions, except fascia dentata and subiculum. CONCLUSION: Unlike the reports in animal models the present results indicate that chronic seizures in TLE patients are not sufficient to induce HSP70 and HSP90 activation. Typical attributes inherent to TLE condition may be determinants of low HSP expression. In Addition, our results suggest that low expression of HSPs in epileptic groups may be related to seizure maintenance.

Expresión de CD-34 en el elastofibroma. Estudio clinicopatológico, histoquímico e inmunohistoquímico de cuatro casos / Cd-34 expression in elastofibroma. Histochemical, immunohistochemical and clinopathological study of four cases

Objetivo. Explorar la expresión imunohistoquímica de células en casos de elastofibroma y evaluar cuatro técnicas histoquímicas para fibras elásticas. Material y métodos. Se obtuvieron cuatro elastofibromas de los archivos del departamento de patología del Hospital ABC. Todos los pacientes fueron mujeres cuyas lesiones se encontraron en la región subescapular. Se realizó inmunohistoquímica para CD34, actina, desmina, vimentina, proteína S-100 y bcl-2 y se evaluaron cuatro métodos para fibras elásticas (Verhoff, Gallego, Reyes-Mota y Russel-Movat). Resultados. En los cuatro casos habían numerosos miofibroblastos (positivos a la vimentina/actina/desmina). Además encontramos células dendríticas distribuidas irregularmente, positivas al CD34. Las tinciones de Verhoff y Reyes-Mota son las que mejor resaltan el componente elástico. El método de Russel-Movat es útil para distinguir diferentes componentes de tejido conectivo. Conclusión. Las células del elastofibroma originalmente se consideraron fibroblastos. La presencia de vimentina/actina/desmina sugiere que existe una población de miofibroblastos. Describimos por primera vez, células fusiformes y dendríticas, positivas al CD34 (QBend/10) distribuidas irregularmente en toda la lesión. Estas células pueden ser población reactiva de células del ®sistema dendrítico dérmico¼. No encontramos inmunorreactividad para bcl-2 en las células fusiformes y dendríticas

Transición de la forma enzimática latente a activa como un modelo de regulación de la degradación de matriz extracelular en el corioamnios durante el trabajo de parto humano / Transition from the laten to active enzymatic form asa regulation model for the degradation of choriomniotic extracelular matrix during human labor

Las metaloprotesas de matriz extracelular (MMP) son las mediadoras fisiológicas de la degradación de la colágena y su participación en la fisiopatogenia de la ruptura prematura de membranas ha sido sugerida por nuestro grupo. Con objeto de definir si algunas MMP se activan de manera coordinada con el trabajo de parto en las membranas fetales, analizamos la actividad enzimática y proteína inmunorreactiva presente en extractos de membranas obtenidas durante cesáreas, sin trabajo de parto, aunque su actividad/cantidad fue apenas detectable. En cambio los extractos de membranas fetales obtenidas durante el trabajo de parto activo, mostraron gran actividad/cantidad de ésta MMP. Con ayuda de un anticuerpo monoclonal, fue posible demostrar que la forma activa de la MMP-9 se podía encontrar sólo en las muestras con trabajo de parto. La MMP-9 y su ARN mensajero correspondiente fueron localizados por inmunohistoquímica e hibridación in situ en el epitelio amniótico, en algunos fibroblastos de la capa compacta y en células con características de trofoblasto en el corion. Se concluye que: 1. La actividad y la cantidad de la MMP-9 se incrementa de manera selectiva asociada al trabajo de parto y 2. que esta enzima es expresada por diferentes poblaciones celulares de la membrana fetal

Primeros reportes de inmunohistoquímica en la lesión dérmica de Bartonellosis / Firts reports of the immonuhistochemistry at skin lesion of the bartonellosis

Se hace una revisión de algunos estudios previos referentes a Bartonellosis, destacando los primeros hallazgos con métodos de inmunohistoquímica y su correlación clínico patológica, realizados en biopsias de piel de pacientes con fase histiode, en el Hospital Nacional "Guillermo Almenara Irigoyen" IPSS en 1983.

Ultraestructura e inmunocitoquimica como ayuda diagnóstica anatomía patológica / Ultrastructure and immunocytochemistry as diagnostic in anaromical pathology

Se describen las ventajas de la microscopia electrónica y de la inmunocitoquímica como técnicas auxiliares en el diagnóstico anatomopatológico de los tumores. Se señalan detalles sobre ambos métodos y sobre los hallazgos en diversos tumores pocos diferenciados. Se destaca la importancia de aplicar estos métodos diagnósticos en el país, indicando cual es la realidad nacional y proponiendo una mejor utilización de nuestros recursos para mejorar el diagnóstico anatomopatológico de los tumores